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PCR實(shí)驗(yàn)

靶基因PCR擴(kuò)增動力曲線                       PCR熔解曲線       

實(shí)驗(yàn)標(biāo)本收集及保存方法：

1：病理標(biāo)本收集及保存：

1）冰凍切片：取下適當(dāng)?shù)慕M織塊放于液氮保存；   

2）石蠟切片：取下適當(dāng)?shù)慕M織塊放于4%多聚jia 醛保存；

3）細(xì)胞爬片：細(xì)胞爬片4%多聚jia 醛固定30min，換PBS浸沒4℃保存。

2：分子生物學(xué)標(biāo)本收集及保存：

1）新鮮組織：切割標(biāo)本后放于液氮或者-80℃冰箱保存；            

2）石蠟標(biāo)本：常溫保存；

3）全血標(biāo)本：取適量全血加入EDTA或肝素抗凝采血管；           

4）體液標(biāo)本：高速離心取沉淀；

5）細(xì)胞標(biāo)本：細(xì)胞加TRizol裂解后液氮或者-80℃冰箱保存。

3：蛋白質(zhì)實(shí)驗(yàn)標(biāo)本收集及保存：

1）新鮮組織：切割標(biāo)本后放于液氮或者-80℃冰箱保存；     

2）全血標(biāo)本：取適量全血加入EDTA或肝素抗凝采血管；      

3）細(xì)胞標(biāo)本：細(xì)胞加細(xì)胞裂解液充分裂解后液氮或者-80℃冰箱保存。

4：ELISA、放免、生化實(shí)驗(yàn)標(biāo)本收集及保存：

    1）血清（血漿）樣本：取全血加入促凝管（抗凝管），2500轉(zhuǎn)離心20分鐘左右，收集上清，液氮或者-80℃冰箱保存；

    2）尿液樣本：樣本2500轉(zhuǎn)離心20分鐘左右，液氮或者-80℃冰箱保存；胸腹水、腦脊液、肺泡灌洗液參照此實(shí)行；

3）細(xì)胞樣本：檢測分泌性的成份時(shí)，樣本2500轉(zhuǎn)離心20分鐘左右，液氮或者-80℃冰箱保存；檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS稀釋細(xì)胞懸液，通過反復(fù)凍融，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份，2500轉(zhuǎn)離心20分鐘左右，收集上清同上；

4）組織樣本：切割標(biāo)本后，稱取重量，用液氮或者-80℃冰箱冷凍保存?zhèn)溆谩?/span>

5：代謝組學(xué)標(biāo)本收集：

    1）尿液樣本：樣本2500轉(zhuǎn)離心20分鐘左右，液氮或者-80℃冰箱保存；胸腹水、腦脊液、肺泡灌洗液等參照此實(shí)行；

    2）組織樣本切割標(biāo)本后，稱取重量，用液氮或者-80℃冰箱冷凍保存?zhèn)溆谩?/span>
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